革兰氏染色法,革兰氏染色的步骤和原理?
最后一步可以省略通常革兰氏染色法包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤1.初染:向玻片上滴加结晶紫2.媒染:向玻片上滴加卢氏碘液(都只是简单写一下)上述两部革兰氏染色法,作用是将细菌细胞壁着色3.脱色:这是最重要的一步一般用酒精进行脱色,时间很短大概30s左右。经过脱色,如果该细菌是革兰氏阳性菌,那么由于其细胞壁含有大量肽聚糖,会将染色剂保留在细胞壁中,在油镜下观察为紫色。如果是革兰氏阴性菌,由于它的细胞壁中肽聚糖含量很低,并且革兰氏阴性菌还有一层外膜,脂含量高。在经过脱色剂,外膜会迅速溶解,阴性菌那层薄薄的肽聚糖层无法阻挡染色剂的溶出。最终基本成无色或很淡的紫色。到这一步其实就已经将两种类型的细菌分开了。阳性菌油镜呈紫色,阴性菌呈无色。4.如果再经过最后一步(复染)无色的阴性菌会被复红染成红色。当然这一步可省可不省。复染的目的是为了让两种菌的染色差别更大,更好观察。希望可以帮到你
常用的细胞染色方法有哪些?
常用的细胞染色方法有:1、简单染色法,常用碱性染料如美蓝等进行简单染色;2、革兰氏染色法,主要包括结晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或丙酮)脱色以及番红复染四个过程;3、瑞氏染色法,瑞氏染料溶剂主要是由伊红美蓝组成;4、吉姆萨染色法,吉姆萨染色原理与结果和瑞特染色法基本相同;5、细胞免疫荧光染色法,免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合。染色是生物显微玻片标本制作中最重要的环节之一。先把破坏细胞膜的选择透过性,再使用染色剂,将生物组织浸入染色剂内,使组织细胞的某一部分染上与其他部分不同的颜色或深度不同的颜色,产生不同的折射率,以便观察。另外,银染法也较常用。当组织块浸入硝酸银溶液中时,有的组织结构能直接把硝酸银还原,使银粒附于其上,呈棕黑色或棕黄色。有些结构本身对硝酸银无直接还原能力,若加入还原剂,可使硝酸银还原沉淀显色。染色细胞固定有物理法与化学法,物理法为干燥和火焰固定,化学法最常用的是甲醛、乙醇、丙酮和醋酸等。1、偶氮偶联法:利用人工合成的酶底物,在酶作用下,产生分解产物,再与重氮盐结合引起偶氮偶联,使其形成不溶性的偶氮色素,以此证明酶的存在。2、联苯胺法:粒细胞和单核细胞中的过氧化物酶作用于过氧化氢,释放新生态氧,使无色的联苯胺形成蓝色沉淀。3、普鲁士蓝法:细胞内、外铁与酸性亚铁氰化钾作用,形成蓝色亚铁氰化铁沉淀。4、雪夫反应:过碘酸氧化细胞内糖类中乙二醇基形成乙醛基,醛基与雪夫试剂作用,使无色品红形成红色沉淀。5、金属沉着法:其他尚有物理学方法,如脂溶性染料染色(显示脂质)、荧光显示、放射自显影以及体外活体染色亦常用于临床血液细胞学诊断。
革兰氏染色法染色液如何实施?
革兰氏染色法染色液如下:① 结晶紫染液:结晶紫,酒精。草酸铵,蒸馏水两液混合即成。② 革兰氏碘液:碘片,碘化钾,蒸馏水。先将碘化钾加于3 ~5毫升蒸馏水中,溶解后再加碘片,用力摇 匀,待碘片完全溶解,再将蒸馏水加至足量。③ 酒精(9):作脱色剂。④ 番红(沙黄):复染液。番红纯酒精溶液蒸馏水,二者混合即成。染色法:首先涂片自然干燥后,经火焰固定,用结晶紫染液染色1~2分 钟。水洗后加碘溶液于片上,固定1~2分钟。再次水洗后用9酒 精脱色10 ~ 20秒。第三次水洗后,以番红复染1分钟,水洗,以吸水纸吸干,镜检。