革兰氏染色法,革兰氏染色法的重要性是什么?
为了研究细菌的形态革兰氏染色法,微生物学家发明了对细菌的染色,有用一种染色剂的称单染,仅能对细菌形态观察。用两种以上的称复染,革兰氏发明了复染色法;先后用两种染色剂和媒染剂、脱色剂组合,由此而命名为革兰染色。革兰染色不仅可以观察细菌的形态,同时将细菌分为两大类。一类是染色阳性菌是紫色,另一类染色阴性的是红色。由于细菌的结构上的差异,形成了不同的染色效果。了解染色性能有助于临床用药和细菌的鉴定;如青霉素对革兰染色阳性菌有效,当化脓性细菌感染可首选药物。而氟哌酸对革兰染色阴性杆菌有效,如肠道病、腹泻为常用药。当从尿道培养出革兰阴性双球菌,可以作为淋病感染的重要指症。如出现革兰染色阳性的葡萄球菌,又可作为金黄色葡萄球菌感染依据。
革兰氏染色的机制是什么?
革兰氏染色法革兰氏染色法细菌学广泛使用种鉴别染色法1884年由丹麦医师Gram创立 细菌先经碱性染料结晶染色而经碘液媒染用酒精脱色定条件下有细菌此色被脱去有被脱去因此把细菌分两大类前者叫做革兰氏阳性菌(G+)者革兰氏阴性菌(G—)观察方便脱色再用种红色染料碱性蕃红等进行复染阳性菌仍带紫色阴性菌则被染上红色有芽胞杆菌和绝大多数和球菌及所有放线菌和真菌都呈革兰氏正反应;弧菌螺旋体和大多数致病性无芽胞杆菌都呈现负反应革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌化学组成和生理性质上有多差别染色反应样现般认革兰氏阳性菌体内含有特殊核蛋白质镁盐与多糖复合物与碘和结晶紫复合物结合牢易脱色阴性菌复合物结合程度底吸附染料差易脱色染色反应主要依据 另外阳性菌菌体等电点较阴性菌低相同PH条件下进行染色阳性菌吸附碱性染料多因此易脱去阴性菌则相反所染色时条件要严格控制例强碱条件下进行染色两类菌吸附碱性染料都多都呈正反应;PH低时则都呈负反应此外两类菌细胞壁等对结晶紫—碘复合物通透性也致阳性菌透性小故易被脱色阴性菌透性大易脱色所脱色时间脱色方法也应严格控制 革兰氏染色原理:G+菌:细胞壁厚肽聚糖网状分子形成种透性障当乙醇脱色时肽聚糖脱水而孔障缩小故保留结晶紫-碘复合物细胞膜上呈紫色Gˉ菌:肽聚糖层薄交联松散乙醇脱色能使其结构收缩其脂含量高,乙醇脂溶解缝隙加大结晶紫-碘复合物溶出细胞壁沙黄复染呈红色革兰氏染色法般包括初染、媒染、脱色、复染等四步骤具体操作方法:1)涂片固定2)草酸铵结晶紫染1分钟3)自来水冲洗4)加碘液覆盖涂面染1分钟5)水洗用吸水纸吸去水分6)加95%酒精数滴并轻轻摇动进行脱色30秒水洗吸去水分7)蕃红染色液(稀)(或沙黄)染10秒钟自来水冲洗干燥镜检染色结革兰氏正反应菌体都呈紫色负反应菌体都呈红色。