ms培养基,MS培养基配方的配制步骤
原发布者:鲨鱼鲜生
MS培养基母液的配制:20×MS大量元素(1L):38gKNO3,33gNH4NO3,8.8gCaCl2·2H2O,7.4gMgSO4·7H2O,3.4gKH2PO4ms培养基。200×MS微量元素(1L):0.166gKI,1.24gH3BO3,4.46gMnSO4·4H2O,1.72gZnSO4·7H2O,0.05gNa2MoO4·2H2O,0.005gCuSO4·5H2O,0.005gCoCl2·6H2O。200×MS维生素和氨基酸(1L):20g肌醇,0.1g烟酸,0.1g盐酸吡哆醇(VB6),0.02g盐酸硫胺素(thiaminehydrochloride,VB1),0.4g甘氨酸。200×MS铁盐(1L):5.56gFeSO4·7H2O,7.46gNa2EDTA·2H2O,先溶于500mLddH2O,加热,调pH至5.5,定容至1L。注意:配制大量元素母液时,为避免产生沉淀,要用纯度高的重蒸馏水溶解,药品采用分析纯。化学药品先以少量重蒸馏水充分溶解后然后混合,混合时需注意边搅拌边混合。CaCl2·2H2O要在最后单独加入,在溶解CaCl2·2H2O时,蒸馏水需加热沸腾,除去水中的CO2,以防沉淀。配制铁盐母液时,FeSO4和Na2-EDTA应分别加热溶解后混合,并置于磁力搅拌器上不断搅拌至溶液呈金黄色(约加热20-30min),调pH值至5.5,室温放置冷却后,再冷藏。使用上述配好的母液,按照稀释倍数,配制基础MS培养液:1×MS大量元素,1×MS微量元素,1×MS维生素和氨基酸,1×MS铁盐,蔗糖30g/L,定容后调节pH至5.8,高温高压灭菌。固体培养基含植物凝胶3.5g/L或琼脂9g/L。另MS基本培养基可用MurashigeandSkoogBasalSaltMixture(Sigma-Aldrich)快速配制。播种方法:
不建议食用
MS培养基是植物组织培养中常用的一种培养基,最初是为烟草细胞培养设计。其特点是无机盐和离子浓度较高,能满足植物细胞的营养和生理需要,在食用方面并无突出优点,甚至部分成分对人体有损,因此不建议食用。
其主要成分如下:
硝酸钾 KNO3 ,硝酸铵 NH4NO3
磷酸二氢钾 KH2PO4,硫酸镁 MgSO4.7H2O,氯化钙 CaCl2.2H2O,碘化钾 KI,硼酸 H3BO3,硫酸锰 MnSO4.4H2O,硫酸锌 ZnSO4.7 H2O钼酸钠 Na2MoO4.2 H2O,硫酸铜 CuSO4.5 H2O,氯化钴 CoCl2
,铁盐(乙二胺四乙酸二钠,硫酸亚铁 FeSO24.7H2O),肌醇,甘氨酸,盐酸硫胺素,VB,盐酸吡哆醇,VB6,烟酸 VB5或VPP,蔗糖,琼脂等
另外,MS培养基中还需要加入2,4-二氯苯氧 乙酸(2,4-D)、[烈宜醄NAA)、6-苄基嘌 呤(6-BA)等植物生长调节物质。――参考百度百科关于ms培养基的解释。
原发布者:泥越
LB培养基和MS培养基的比较
疑难问题:在选修1教材中出现两种培养基,有必要整理它们之间的不同之处,以免在回答问题时混淆。
一、LB培养基
LB一般被解释为Luria-Bertani培养基,根据其发明人贝尔塔尼(GiuseppeBertani)的说法,这个名字来源于英语的lysogenybroth,即溶菌肉汤。
1.用途
一般用该培养基来预培养菌种,使菌种成倍扩增,达到使用要求,可分为液体培养基和固体培养基。
2.LB培养基的配方
胰蛋白胨(Tryptone))10g/L
国产的胰蛋白胨一般是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化而得到,与进口的成分和工艺不同。进口的胰蛋白胨以酪蛋白为基础实行消化,实为胰酪蛋白胨;而国产的是以肉、骨为原料。含有丰富的氮源、氨基酸等,可配制各种微生物培养基,用于细菌的培养、分离、增殖、鉴定
酵母提取物(YE)5g/L
采用以蛋白质含量丰富的食用酵母为原料,采用自溶、酶解、分离、浓缩等现代生物高新技术,将酵母细胞内的蛋白质、核酸等实行降解后精制而成的一种棕黄色可溶性膏状或浅黄色粉状纯天然制品。主要成分为多肽、氨基酸、呈味核苷酸、B族维生素及微量元素。
氯化钠(NaCl)10g/L
另外根据经验值用NaOH调节该培养基的pH,使其达到7.4,该pH适合当前使用最广的原核表达菌种大肠杆菌(E.coli)的生长。2.MS固体培养基的配方(单位