dmem培养基,MEM与DMEM的区别?
MEM-EBSS培养基与DMEM培养基有什么区别MEM培养基是哺乳动物细胞的理想培养基,通常用于贴壁细胞的培养,通过对配方进行修正,可以用于其他类型细胞的培养,如无钙MEM培养基可以用于悬浮细胞的培养,含有Hank’s盐的MEM培养基可以用于二倍体细胞的培养.体外培养细胞所需的营养物质与体内相同,主要有糖dmem培养基、氨基酸和维生素三大类.目前市面上销售的合成培养基如1640、199等所含的氨基酸已足够,但在使用合成培养基时,仍需加入一些天然成份,如人或动物的血清、血浆和胎汁等.目前主要使用血清,以牛血清为主.血清的生物效应早已证明,它含有多种促细胞生长因子、促贴附因子及其它活性物质等.不仅能促进细胞增长且能帮助细胞贴壁.不同血清对细胞作用不同. DMEM培养基和1640培养基在用途上还有不小的区别,如DMEM培养基体外培养的巨噬细胞存活率和成层率高、吞噬能力强,与RPMI 1640相比,DMEM可作为一种简单而实用的体外分离培养巨噬细胞的培养基.
1. Marc145细胞
上皮样细胞,来源于猴肾细胞,从母细胞(MA 104细胞)克隆而得到,可连续培养.
2. 生长培养基
DMEM(高糖型,含4500mg/L D-葡萄糖、L-谷氨酰胺,和110mg/L丙酮酸钠,不含碳酸氢钠)+
5%~10%新生牛血清+ 1%双抗(青霉素和链霉素)的培养液.
3. 冻存液
生长培养基+10% DMSO
4. 细胞健康生长的几项注意事项
1)细胞没有支原体等外源因子的感染.
2)培养液的pH值可在7.0-7.3,以7.2为佳.
3)一般按1:3传代,细胞接种密度为1-1.5×105cells/ml,48hr后长成单层.
4)培养基和血清的质量可靠、稳定;建议采用特级小牛血清.
5)细胞及时传代,不可以在老化后传代,一般在刚长成细胞单层时进行传代、扩增.
6)细胞传代时消化液用0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA,消化过程应尽量缩短在1~2分钟内完成.
DMEM是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基,
DMEM细胞培养基是在MEM培养基的基础上研制的。与MEM比较增加了各种成分用量,同时又分为高糖型(低于4500g/L)和低糖型(低于1000g/L)。高糖型有利于细胞停泊于一个位置生长,适于生长较快、附着较困难肿瘤细胞等。
这种培养基的特点:
(1)氨基酸含量为依格尔培养基的2倍,且含有非必需氨基酸,如甘氨酸等;
(2)维生素含量为依格尔培养基的4倍;
(3)含有糖酵解途径中的重要物质——丙酮酸;
(4)含有微量的铁离子。
该类培养基广泛应用于疫苗生产和各种初代病毒宿主细胞的细胞培养及单一细胞培养;如A9、3T6、BALB/3T3、COS-1、COS-3、COS-7、L6、WEHI-3b等细胞系的培养。
1640培养基和DMEM培养基在组分和用途上有区别,主要是组分上的区别,查各自的配方表可知。用途上这两种培养基应用都很广泛,且都适合很多种细胞的培养。
RPMI 1640主要用于悬浮细胞培养。可适用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞,杂交瘤细胞的培养。其它像K-562、HL-60、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。
DMEM适用于贴壁细胞生长,如各种实体瘤贴壁细胞。
要选用哪种培养基,建议先查查参考文献,也可ATCC上查一下细胞介绍,或买细胞株时咨询,最好自己摸索,选出更适合的。
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